1. INTRODUCCIÓN

La Leucosis Enzootica Bovina es una enfermedad vírica que afecta con frecuencia a las explotaciones lecheras a nivel mundial, ya que influye directamente el hacinamiento y las diferentes prácticas veterinarias que facilitan su expansión (Gutiérrez et al., 2020). Es causada por el virus de Leucosis Bovina (BLV) que es un Deltaretrovirus de la familia Retroviridae (Wu et al., 2003; Baruta et al., 2012; Choudhury et al., 2013), y se caracteriza por afectar el sistema inmune de los bovinos específicamente los linfocitos B (Tomita et al., 2013; Aida et al., 2014), aunque tiene la capacidad de infectar a los linfocitos T y monocitos (Chamizo, 2005; Hagiwara et al., 2014).

El Virus de la Leucosis Bovina (BLV) está compuesto por ARN, y presenta cadena simple diploide, que contiene información para las proteínas estructurales y enzimas, además, codifica proteínas no estructurales (Vogt, 1997); las cuales tienen importancia fundamental en la interacción del virus con la célula hospedadora, modulando la expresión de genes virales y celulares, la replicación viral y la patogénesis (Willems et al., 2000).

La transmisión puede darse de manera horizontal, de animal a animal (Gutierrez, 2010), o de manera vertical, de madre a hijo (Hagiwara et al., 2014). Los animales portadores asintomáticos se consideran la principal fuente de contagio en los hatos lecheros (Gutierrez, 2010), debido a que el virus ingresa al organismo del hospedero a través de células infectadas por contacto directo entre fluidos corporales de sangre, saliva, semen (Dus Santos et al., 2007), leche o calostro (Nagy et al., 2003) o también por procedimientos iatrogénicos con baja asepsia, reutilización de agujas infectadas o guantes de palpación (Orteaga et al., 2016), donde se puede encontrar linfocitos infectados (Gutiérrez, 2010; Choudhury et al., 2013; Khamesipour et al., 2013).

La enfermedad es muy elevada en un hato lechero, la trasmisión de manera horizontal se ve más favorecida especialmente durante los meses de verano en los cuáles se presenta mayor población de insectos, hecho que dificulta su erradicación (Rola-Łuszczak et al., 2013); por lo contrario, la trasmisión vertical es de menor importancia, debido a que menos del 10% de los animales nacidos de madres portadoras presentan el virus (Gutiérrez, 2010).

Los animales infectados con el virus generalmente son asintomáticos; sin embargo, la exoftalmia es el signo más específico de la enfermedad, en la cual se produce la degeneración del tejido retro ocular y de las estructuras internas del ojo (Malatestinic, 2003). De los ejemplares que se infectan, el 30-70% desarrolla una linfocitosis persistente (Benavides et al., 2013; Cenuse et al., 2013; Sandev et al., 2013, Forti et al., 2014), mientras que entre el 0.1-10% de bovinos con más de tres años de infección, presentan la forma tumoral de la enfermedad o linfosarcoma (LS), en la cual los nódulos linfáticos aumentan de tamaño (Dess et al., 1996; OIE, 2012). Los órganos más afectados con más frecuencia son la cuarta cavidad del rumen, la aurícula derecha del corazón, el bazo, el intestino, el hígado, el riñón, el omaso, los pulmones y el útero (Abdala et al., 2013).

La susceptibilidad del ganado a una linfocitosis persistente y al desarrollo de tumores, varía de acuerdo a diversos factores dentro de los cuales destacan la edad, la genética y la raza (Frie & Coussens, 2015). Existen trabajos recientes que indican un efecto negativo en la producción y calidad de la leche debido a la infección, encontrándose una asociación lineal entre la mayor prevalencia de infección por el BLV y una menor producción de leche (Ott et al., 2003; Erskine et al., 2012). La infección por BLV también se ha asociado con un aumento en el recuento de células somáticas en leche, lo cual sucede especialmente en vacas con más de cuatro lactancias (Yang et al., 2016).

Existe una prevalencia aproximada del 47.21% a nivel de Latinoamérica del sur, reportando el 92.7 % y 77% los países de Perú y Uruguay respectivamente (Gutierrez et al., 2020). Sin embargo, debido a que la gran mayoría de animales infectados por esta enfermedad son asintomáticos no se le brinda la importancia pertinente, por lo que este trabajo tiene como finalidad evaluar la seroprevalencia de Leucosis bovina en establos de Chachapoyas y Pomacochas.

2. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1. Lugar de estudio

Los establos se encuentran ubicados en el departamento de Amazonas, uno de ellos en el Distrito de Chachapoyas, localidad de Chachapoyas con una altitud de 2 335 m.s.n.m y el otro establo en el distrito de La Florida, localidad de Pomacochas que cuenta con una altitud de 2 225 m.s.n.m.

2.2. Muestras en estudio

Se recolectaron 78 muestras de sangre de semovientes de ambos sexos, entre dos meses y diez años de edad considerando las razas Jersey, Brown Swiss, Aberdeen Angus, Simmental y Otras razas.

2.3. Análisis serológico de Leucosis bovina

Se extrajo sangre directamente de la vena coccígea utilizando agujas BD Vacutainer calibre 20Gx1” y se colocó en tubos BD Vacutainer sin anticoagulante. Una vez tomadas las muestras, se rotularon los tubos con el nombre del animal, edad y raza, para luego ser transportadas rápidamente al Laboratorio de Enfermedades Infecciosas y Parasitarias de Animales Domesticas de la Universidad Nacional Toribio Rodríguez de Mendoza de Amazonas para ser procesadas inmediatamente. Los sueros extraídos fueron almacenados a -17 °C, hasta el momento de su análisis.

Las muestras de suero se procesaron mediante la técnica de ELISA. El procedimiento se realizó según las indicaciones del inserto del kit comercial (IDEXX Leukosis Serum X2 Ab Test), para ello se colocaron 90 µl de dilución de antígeno en cada pocillo de las placas de poliestireno, a los que se le agregó independientemente 10 µl de muestra (suero sanguíneo), y en pocillos duplicados 10 µl de control positivo y 10 µl control negativo. Luego de incubar a +37 °C (±3 °C) durante 60 minutos (±5), se eliminó el contenido y se realizó los 3 lavados utilizando 300 µl de solución de lavado. Se agregó 100 µl por pocillo de anti-inmunoglobulina bovina marcada con peroxidasa, se incubó a 60 minutos (±5) a +37°C (±3 °C) y se eliminó el contenido. Luego de realizar los 3 lavados utilizando 300 µl de solución de lavado, se agregó 100 µl de la solución de sustrato (TMB) a cada pocillo, se incubó a 18 - 25 °C durante 15 minutos (±3 °C) y se le adicionó 100 µl de solución stop. Los resultados se colocaron en el lector de absorción de microplacas iMark™ (BIO-RAD, EEUU) utilizando un espectrofotómetro con filtro a 450 nm.

2.4. Análisis de datos

Los datos fueron procesados mediante el Software SPSS utilizando estadística descriptiva y la prueba de chi-cuadrado para realizar la comparación entre variables.

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

3.1. Leucosis bovina según lugar de procedencia

El procesamiento de las muestras mediante la técnica de ELISA, permitió evidenciar que, de 78 muestras, el 14.1% de los animales presentan la enfermedad de Leucosis Bovina, siendo el 11.5 % pertenecientes al distrito de Pomacochas y el 2.6% al distrito de Chachapoyas (Tabla 1). Según el coeficiente de contigencia r = 0.1 indica que no existe una relación entre la procedencia y la presencia del virus en los animales (p = 0.375 > 0.5), de igual modo la prueba chi-cuadrado reportó que la presencia del virus en los animales es independiente de su procedencia (x2 = 0.787; p = 0.375 > 0.05), caso contrario ocurrió en un estudio epidemiológico de BLV realizado en el 2015 en un establo lechero de Lima, donde se obtuvo una seroprevalencia elevada de 92.7% (Sandoval et al., 2015).

Tabla 1.
Presencia de Leucosis bovina según lugar de procedencia

	PROCEDENCIA		TOTAL
	Chachapoyas	Pomacochas
Positivo	2.6%	11.5%	14.1%
Negativo	26.9%	59.0%	85.9%

Otra investigación realizada en 7 prefecturas de Japón, reportó una prevalencia general de infección para BLV de 28.6 % (Murakami et al., 2011), mientras que en las haciendas del litoral ecuatoriano la prevalencia encontrada fue de 14.3% según Vallejo (1991); valores superiores a los reportados en la presente investigación. Por el contrario, estudios realizados por Puma y Yanza (2013) reportaron una prevalencia de 6.1%, y Bonifaz y Ulcuango (2015), una seropositividad de 5.6%, están dentro de los rangos obtenidos en el presente estudio.

3.2. Leucosis bovina según raza

Con respecto a la relación que tienen las razas con la presencia del virus, se puede deducir que el mayor porcentaje lo presentan las razas Aberdeen Angus y Simmental con 7.7% y 2.6% respectivamente, mientras que las razas Jersey y Brown Swiss obtuvieron 1.3% (Tabla 2). Se obtuvo un coeficiente de contigencia r = 0.224, el cual indica que no existe relación entre la raza y la presencia del virus en los animales (p = 0.388 > 0.5), de la misma manera que la prueba chi-cuadrado (x² = 4.136; p = 0.388 > 0.05) reafirma lo descrito anteriormente.

Sin embargo, trabajos anteriores revelan una seroprevalencia, mucho mayores a la presente investigación, del 50% en la raza Holstein en 100 hatos lecheros ubicados en el Atlántico medio de Estados Unidos (Rhodes, Pelzer & Johnson 2003); del mismo modo, en el estado de Michigan (Estados Unidos), las vacas Holstein que padecían esta enfermedad se ven afectadas a nivel de producción lechera en 1.1% (Nor­by et al. 2016) y en la calidad de leche debido a que producen menor cantidad de proteínas (Szewczuk et al., 2012).

Tabla 2.
Presencia de Leucosis bovina según raza

	RAZA					TOTAL
	Jersey	Brown Swiss	Aberdeen Angus	Simmental	Otras razas
Positivo	1.3%	1.3%	7.7%	2.6%	1.3%	14.1%
Negativo	14.1%	5.1%	24.4%	37.2%	5.1%	85.9%

3.3. Leucosis bovina según sexo

En esta investigación se obtuvo que el mayor porcentaje de casos positivos lo presentan las hembras con 11.5% (Tabla 3), donde los datos del coeficiente de contigencia (r = 0.016; p = 0.884 > 0.5) y la prueba de chi – cuadrado (x² = 0.021; p = 0.884 > 0.05) reportaron que la presencia del virus en los bovinos es independiente de su sexo.

Tabla 3.
Presencia de Leucosis bovina según sexo

	SEXO		TOTAL
	Hembra	Macho
Positivo	11.5%	2.6%	14.1%
Negativo	71.8%	14.1%	85.9%

Por otro lado, se obtuvo que la presencia de la enfermedad respecto al sexo (hembras 11.5% y machos 2.6%), observando que las hembras son más propensas a padecer Leucosis bovina, coincidiendo con el trabajo de Vásconez et al., (2017) en Ecuador, donde las hembras obtuvieron una prevalencia de 77.33%.

3.4. Leucosis bovina según la edad

En esta investigación donde se obtuvo el 5.1% en animales de 0.17 – 2.63 años y 7.54 - 10 años (Tabla 4), donde el coeficiente de contigencia y la prueba de chi-cuadrado fueron (r = 0.238; p = 0.197 > 0.5) y (x² = 4.680; p = 0.197 > 0.05) respectivamente, indicando que no existe relación entre la edad del animal y la presencia de la enfermedad. Trabajos realizados en Perú, reportan que Sandoval et al., (2015) obtuvo el 100% para animales mayores de 5 años, 97% para animales de 2 a 5 años y 60 % para menores de 2 años; mientras que, en el 2017, (Vásconez et al., 2017) determinó la seroprevalencia en animales menores de dos años en la provincia de Pichincha con 8.13%.

Tabla 4.
Presencia de Leucosis bovina según la edad

		EDAD (años)					TOTAL
		0.17 - 2.63	2.63 - 5.09	5.09-7.54		7.54 - 10
Positivo	5.1%		1.3%	2.6%	5.1%		14.1%
Negativo	42.3%		17.9%	15.4%	10.3%		85.9%

Con respecto a la relación entre la presencia de la enfermedad y la edad de los animales, se reportó en Colombia la prevalencia del 62% en animales de 1 a 2 años, 75% en bovinos de 2 a 3 años y los mayores de 3 años con 87% (Carrero et al., 2008), caso similar ocurrió con el estudio realizado en Ecuador, donde la seroprevalencia en animales de 4 a 6 años y 7 a 9 años fue de 20.2% y 22.22% respectivamente, observando un aumento proporcional entre la edad y la cantidad de enfermos, concluyendo que a mayor permanencia en el hato existe mayor probabilidad de contagio (Torres, 2001).

Debido a que hasta la actualidad ninguna vacuna ha tenido éxito y no hay tratamiento contra el virus de Leucosis Bovina, se recomienda mejorar las buenas prácticas de manejo como realizar protocolos de asepsia para tratamientos iatrogénicos, individualizar el uso de agujas, guantes de palpación y evitar el contacto directo entre fluidos corporales (sangre, saliva, leche, semen y calostro) para evitar la propagación del virus en los hatos ganaderos.

4. CONCLUSIONES

Se obtuvo una prevalencia del 14.1 % para Leucosis Bovina mediante la técnica de ELISA, de los cuales el 11.5% pertenece al distrito de Pomacochas y el 2.6% al distrito de Chachapoyas. La raza Aberdeen Angus (7.7%) reportó el mayor porcentaje con relación a las demás razas estudiadas. Según el sexo, las hembras (11.5%) son más propensas a padecer esta enfermedad y con respecto a la edad, los bovinos menores de 2.6 años y mayores de 7.6 años presentaron mayor prevalencia con 5.1 %. Sin embargo, la presencia del virus de Leucosis bovina no tiene relación directa con la zona de procedencia, raza, sexo o edad de los bovinos.

Agradecimiento

Los autores agradecen al financiamiento del proyecto SNIP 292900 “Creación del laboratorio de Enfermedades Infecciosas y Parasitarias de Animales Domésticos”, que apoyo directamente en la ejecución de esta investigación colocando a disposición equipos, materiales y personal técnico.

Referencias

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Enlace alternativo

http://revistas.untrm.edu.pe/index.php/RIAGROP/article/view/704 (html)