Recepción: 30 Julio 2018
Aprobación: 20 Octubre 2018
Resumen:
RESUMEN
Esta investigación fue desarrollada con el objetivo de conocer la presentación de Cuerpos Lúteos (CL), cavitarios (CLc) o compactos (CLcom) en ovarios de hembras bovinas cíclicas. Posteriormente se correlacionaron los hallazgos con la categoría de longevidad reproductiva y se evaluó la efectividad del diagnóstico de uno u otro tipo de cuerpo lúteo por palpación manual contra un diagnóstico auxiliado por ecografía. El estudio consistió en inspeccionar ovarios funcionales de 200 vacas, obtenidos al azar en el matadero, donde se determinó la cantidad y proporción de los CLc y CLcom; tomando en cuenta la clasificación de las vacas por categoría de longevidad reproductiva (viejas, adultas y jóvenes). Los ovarios fueron llevados al laboratorio para ser evaluados visual, manual y ecográficamente empleando un ecógrafo con una sonda lineal de 7.5 Mhz. La presentación de CLc, fue ligeramente superior que la de CLcom (115 vs 85). Con respecto al área de los CLc, las mismas resultaron superiores al área de los CLcom y puede en alguna medida soportar el supuesto de que la cantidad de tejido luteal presente en ellos puede suplir aquella parte que no aparece por existir en su lugar una cavidad. La longevidad reproductiva no influyó en la presentación de CLc. No se encontró diferencias estadísticas en la frecuencia de presentación de cuerpos CLc o CLcom, diagnosticados por ecografía o palpación. No obstante, la ecografía resultó más eficaz como medio diagnóstico para diferenciar CLc de CLcom.
Palabras clave: Cuerpo Lúteo, cuerpo Lúteo Cavitario, Cuerpo Lúteo Compacto, longevidad reproductiva, ecografía.
Abstract:
ABSTRACT
This research was conducted with the aim of knowing the incidence of Cavitary Corpora Lútea (CLc) or compact (CLcom) in cicling bovine females. Subsequently, the findings were correlated with the reproductive longevity category and the effectiveness of the diagnosis of one or another type of corpus luteum was evaluated by manual palpation against a diagnosis aided by ultrasonography. The study consisted of evaluating functional ovaries in 200 cows slaughtered in slaughterhouse obtained randomly, where the quantity and proportion of CLc and CLcom were determined; taking into account the classification of cows by category of reproductive longevity (olds, adults and youngs). The ovaries were taken to the laboratory to be evaluated visually, manually and ultrasonographically, using an ultrasound scanner with a linear probe of 7.5 Mhz. The presentation of CLc was slightly higher than CLcom (115 vs 85). With respect to the CLc area, these were higher than the area of the compacts and might support the assumption that the amount of luteal tissue present in thems can replace that part that does not appear to exist in its cavity place. The reproductive longevity did not influence the presentation of CLc. No differences were found in the frequency of presentation of corpus luteum, diagnosed by ultrasound or palpation. However, ultrasound diagnostic was superior as a diagnostic method to differentiate CLc from CLcom.
Keywords: corpus luteum, cavitary corpus luteum, compact corpus luteum, reproductive longevity, ultrasonography.
INTRODUCCIÓN
Los sistemas de producción pecuaria se basan en la explotación eficiente de los derivados de origen animal que se generan, buscando satisfacer las necesidades siempre crecientes de alimentación y nutrición humana a nivel mundial. El desarrollo del mejoramiento genético y un manejo adecuado han permitido lograr una mayor productividad en la ganadería. Decuadro (2012), sostuvo que, durante los últimos 50 años, la producción animal creció en volumen y se ha diversificado en la mayoría de los países. Tal evolución se debe no sólo al mejoramiento de la eficiencia de las
diferentes especies animales, sino al incremento de los conocimientos en las áreas de fisiología, manejo, nutrición, genética y reproducción.
Las biotecnologías de la reproducción en bovinos (Contreras et al., 2016; de Armas, 2012; Guerra y Quintero, 2017; Hernández, 2017; Sánchez-Villalba et al., 2018; Solórzano et al., 2017; Souza, 2013), comprenden clásicamente cinco generaciones: la primera y más antigua es la inseminación artificial (IA); la segunda comenzó a desarrollarse en los ´70 y es el control hormonal de la ovulación y la transferencia de embriones (TE); la tercera está constituida por la fecundación in vitro (FIV), el sexaje de semen y embriones, la cuarta generación es la clonación y la quinta sin dudas es la transgénesis.
La técnica de la TE en bovinos requiere de la selección y el manejo, tanto físico como farmacológico, de las donadoras y las receptoras. Los beneficios de esta técnica permiten obtener de una sola vaca con características productivas excepcionales una gran cantidad de terneros, que no se podrían concebir de manera natural. Mediante la TE es posible acelerar el progreso genético, maximizando el potencial gamético de la hembra, ya que al aumentar el número de terneros de una misma progenie se puede evaluar más estrictamente el valor genético de la hembra. A pesar de que a través de las biotecnologías reproductivas se ha logrado un gran avance para incrementar la eficiencia en la producción animal, se hace necesario estudiar y reconocer los factores que pueden afectar los resultados de esta técnica (de Armas, 2012).
El Cuerpo Lúteo (CL), es una glándula endocrina transitoria, secretora de progesterona (P4), la cual juega un papel importante en el mantenimiento de la preñez en los mamíferos domésticos (Uribe et al., 2011). Se han realizado estudios donde se ha planteado que aquellos ovarios que presentan un CL de mayor tamaño (estimado ecográficamente), presentan una mayor cantidad de células luteales funcionando y produciendo P4, lo cual ha sido correlacionado con altos porcentajes de preñez en las técnicas de TE e IA. Se ha observado que existen CL compactos (CLcom) y cuerpos lúteos que presentan una cavidad llena de líquido en su interior. De forma tal que si después de la ovulación, se produce un CL cavitario (CLc), que morfológicamente en su forma exterior presenta un tamaño similar o igual a un CLcom, obviamente esta cavidad estará relacionada con una menor cantidad de tejido luteal presente, lo que pudiese representar una menor cantidad de P4 secretada por el CL. Basándose en esto, diversos autores han planteado que esta condición pudiese ser responsable de una baja fertilidad en la TE. (Duica, 2010;Palma, 2008; Peterson y Lee, 2003).
Aunque la aplicación de la ecografía en las especies bovina y equina se inició en los años 80, su desarrollo y perfeccionamiento para el estudio de los eventos reproductivos se ha acelerado en la presente década y su empleo en los estudios de funcionamiento ovárico ha permitido grandes avances en el conocimiento del tema (Torres, 2012; Trujillo y Peña, 2014). Por esto, una evaluación exhaustiva del CL se hace necesaria y ha quedado demostrada la superioridad de la ecografía sobre la exploración clínica por palpación manual para diagnóstico ovárico (Rivera, 2012). De esta forma se eliminaría la subjetividad por parte del técnico al realizar un diagnóstico manual incorrecto, que podría eliminar receptoras que si presentan un CL adecuado para ser receptoras de embriones al momento de la transferencia.
Motivados por la relativamente escasa información internacional disponible y la inexistente en nuestro país, se nos creó la necesidad de realizar este estudio, para conocer si la proporción de cuerpos lúteos compactos o cavitarios difieren en las hembras bovinas en edad reproductiva en nuestro medio. Por otro lado, deseábamos estudiar si esta condición del CL estaba relacionada con la longevidad reproductiva de las hembras y si la palpación manual del ovario permitiría el diagnóstico diferencial entre un CLc y un CLcom, como conocimientos que pudieran ser valiosos posteriormente para la realización de programas comerciales de TE.
MATERIALES Y MÉTODOS
Los ovarios empleados en los estudios in vitro post mortem, se obtuvieron a partir de hembras sacrificadas en el matadero de Pedregal (MACHISA), en la Provincia de Chiriquí. Una vez retirados los ovarios seleccionados visualmente por la presencia de un CL, estos fueron lavados con alcohol desnaturalizado e introducidos en bolsas plásticas con solución salina, identificadas con el número poseía el animal sacrificado, para garantizar el registro de procedencia de cada par de ovarios. Las bolsas se colocaron en un termo y mantenidos a temperatura ambiente (de 26 a 300C), mientras se transportaron al laboratorio a la mayor brevedad posible.
En el laboratorio se realizó un estudio ecográfico a los ovarios que presentaron CL, empleando un equipo SIUI. CTS-800, con una sonda lineal de 7.5 MHz. Manualmente se colocó el ovario contra el transductor introduciendo ambos en un envase con agua para obtener una mejor imagen y determinar si el cuerpo lúteo era cavitario o compacto. Posteriormente se congeló la imagen en la
pantalla del ecógrafo para hacer las mediciones del CL (cm) y en caso de ser cavitario se midió también su cavidad.
Con estas observaciones se evaluó la incidencia de presentación y eficiencia del diagnóstico manual y ecográfico, de CL Cavitarios (CLc) y Compactos (CLcom), tomando en cuenta la clasificación de las vacas por categoría de longevidad reproductiva (CATLR), se agruparon en: viejas, adultas y jóvenes. Esta categorización se realizó en base al examen clínico veterinario de los ovarios según el tamaño, estructuras (CL y folículos) y cantidad de cicatrices observadas (cuerpos albicans). Resulta necesario destacar que no hubo ningún protocolo hormonal complementario previo al sacrificio.
Como habíamos planteado anteriormente la opción de ovarios funcionales u ovarios efectivos (con CL), fueron 200 unidades. Por ende, el análisis de los datos cuánticos (yi) fueron enmarcados en un arreglo factorial con la base máxima de 200, como posible valor referencial y por cuyo caso los grados de libertad totales fueron de 199. Para el análisis de varianza de los datos se utilizó el paquete estadístico SAS (1999).
Se empleó el siguiente modelo lineal aditivo:
Yijk = µ+Ai + (AB)ik +Eijk3
Yijk = Variables: ancho del CL (ANCL) y alto del CL (ALCL)
µ = Media general
Ai = Grupos de longevidad reproductiva [1mo = 3 (1: viejas, 2: adultas y 3: jóvenes)] Bk = Tipo de CL [1mo = 2 (1: CL cavitario, 2: CL compacto)]
(AB)ik = Proporción Eijk = Residuo
Para determinar el área del CL compacto o cavitario, así como la cavidad del CL se empleó la siguiente fórmula:
A = r1 r2 π
r = Radio
π = Pi (3.1416)
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En el primer estudio (Tabla 1), se evaluó la presencia de CL c y CL com en ovarios obtenidos de matadero con relación a la categoría de longevidad reproductiva (CATLR).
Como se puede apreciar en la Tabla 1, la presentación de CLc fue ligeramente superior que la de CLcom, lo que pudo ser solamente una tendencia matemática, apreciada en este grupo de ovarios. A su vez nuestros resultados (57 por ciento CLcom), son relativamente mayores a lo publicado por Rupérez (2004), referente a que aproximadamente el 30% de los cuerpos lúteos presentan una cavidad y a la observación ecográfica aparece una zona anecogénica de color negro, debido a la acumulación de líquido folicular procedente del folículo del cual se originó el CL. Para el cálculo del área del CL y de las cavidades se realizaron los análisis de varianza y correlación que aparecen a continuación.
El análisis de varianza que incluyó (A: CATLR y B: Tipo de CL), indicó que la ALCL fue diferente entre las CATLR (P < 0.02), no obstante, el tipo de CL tuvo una mayor contribución variativa (Tablas 2 y 3), por lo cual se detectó en general mayor diferencia entre las alturas de los cuerpos
lúteos de acuerdo al tipo de CL (P < 0.001). Sin embargo, la interacción de la CATRL con el tipo de CL no mostró diferencia estadística para la ALCL (P < 0.487).
Al realizar el análisis de varianza (Tabla 4), para las fuentes de variación CATLR (A) por el tipo de CL (B) para el ANCL se nos presenta un resultado similar al descrito anteriormente para la altura del CL (ALCL). Así el ANCL fue diferente entre las CATLR (P < 0.05), no obstante, el TCL generó mayor contribución variativa, detectándose un efecto significativamente superior (P
< 0.001). Aquí también la interacción entre CATLR y TCL no generó diferencia estadística para el ANCL (P < 0.95).
Se evidenció que la presencia de CLc y Clcom ocurren de forma homóloga en las diferentes CATLR. (Tabla 5 y Figura 1).
y = -0.02x2 + 0.04x + 1.61 R² = 1 CL c
y = -0.09x2 + 0.28x + 1.32 R² = 1 CL com
a. Influencia de la CATLR con relación a la ALCL.
La clasificación de las vacas por longevidad mostró una influencia variativa de (P < 0.021); lo cual nos indica que es significativo sobre la altitud del cuerpo lúteo. Como se puede apreciar en el análisis de varianza (Tabla 6).
b. Influencia de la CATLR con relación a la ANCL.
La clasificación de las vacas por CATLR mostró una influencia variativa de (P < 0.05); lo cual nos indica que no es significativo sobre la ANCL. Mientras que la variable tipo de CL si fue altamente significativa P < 0.001 (Tabla 7).
c. Media para las variables ALCL y ANCL.
Según los análisis obtenidos es altamente significativa la variación en ALCL con relación a la ANCL, mostrando (P < 0.0001) una en base a la otra. De estos análisis (Tablas 7, 8 y 9), podemos
inferir que los CLc son de mayor área que los compactos y esto puede en alguna medida soportar la hipótesis que la cantidad de tejido luteal puede ser mayor y suplir aquella parte que no está presente por existir una cavidad. Por otro lado, nuestras observaciones (diámetro del CL entre 1.55 y 2.00 cm), son similares a las de Hafez (2000), quien sostuvo que el diámetro del CL maduro debe tener una medida estimada de 20-25 mm, tomando en cuenta que estos datos pueden variar según la edad, la raza y la paridad de animal.
d. Área del CL tomando en cuenta la ALCL y ANCL con relación a la CATLR.
Posteriormente se estudió la distribución de los ovarios obtenidos de matadero de vacas evaluadas según la CATLR con relación a la cavidad del CL cavitario encontrado mediante ultrasonido.
La clasificación de las vacas por CATLR por la cavidad del CL, no mostró una influencia significativa sobre la ALCV (P < 0.05), como se puede apreciar en la Tabla 11.
La clasificación de las vacas por CATLR por la cavidad del CL, no mostró una influencia significativa sobre la ANCV (P <.0.765). Podemos decir que tanto la ALCV como la ANCV del CL no se ven influenciadas por la CATLR del animal. Lo que soporta la afirmación de que no se apreció diferencias entre categorías de acuerdo a la longevidad reproductiva (Tablas 11, 12 y Figura 2).
Área para la cavidad del CL encontrados en ovarios obtenidos de matadero.
Según, Uribe et al. (2011), Se ha evidenciado en bovinos que los CL cavitarios son los que presentan una cavidad central llena de líquido, siendo originados a partir de mayores folículos preovulatorios, sin afectar la fertilidad, los cuales tienen una importante participación en la secreción de P4. No obstante nuestros resultados muestran que tanto la ALCV como la ANCV del CL no se ven influenciadas por la CATLR del animal.
En el estudio (Tabla 12), se determinó que la media del tamaño de las cavidades fue de 0.65 cm2, lo que queda dentro del rango encontrado por Beal et al. (1992) y Kayacik et al. (2005), quienes
señalan que el tamaño de la cavidad varía, dependiendo del estado del CL y disminuye durante el ciclo estral hasta rellenarse con tejido luteal ecogénico.
De la validación de la eficiencia de la palpación con referencia al diagnóstico ecográfico se obtuvieron los registros que a continuación se relacionan (Tablas 13 y 14), donde la exploración ecográfica brindó resultados, aunque matemáticamente superiores no difirieron estadísticamente y fue más difícil el diagnóstico de CLc por palpación en hembras viejas debido al mayor tamaño y a una menor consistencia de los mismos. De igual forma coincidimos con lo planteado por Bicalho et al. (2008), Mc Dougall y Rhodes (2011) y Piedrahita y Peña (2014), afirmando que la ecografía resulta una herramienta de gran eficacia para el diagnóstico de las estructuras ováricas en hembras bovinas.
CONCLUSIONES
La longevidad reproductiva no influye en la presentación de CLc.
No hay diferencias en la frecuencia de presentación de cuerpos luteos cavitarios o no, diagnosticados por ecografía o palpación.
La ecografía resulta superior como medio diagnóstico para diferenciar CLc de CLcom
Referencias
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