RIZOBACTERIAS PROMOTORAS DE CRECIMIENTO VEGETAL (PGPR): UNA REVISIÓN SISTEMÁTICA 1990-2019

PLANT GROWTH PROMOTING RHIZOBACTERIA (PGPR): A SYSTEMATIC REVIEW 1990-2019

Revista de Investigación Agraria y Ambiental

Universidad Nacional Abierta y a Distancia, Colombia

ISSN: 2145-6097

ISSN-e: 2145-6453

Periodicidad: Semestral

vol. 12, núm. 2, 2021

riaa@unad.edu.co

Recepción: 31 Julio 2020

Aprobación: 27 Octubre 2020

Publicación: 02 Junio 2021

URL: http://portal.amelica.org/ameli/jatsRepo/130/1302302012/index.html

DOI: https://doi.org/10.22490/21456453.4040

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CÓMO CITAR: Posada, A., Mejía, D., Polanco-Echeverry, D., y Cardona, J. (2021). Rizobacterias promotoras de crecimiento vegetal (PGPR): Una revisión sistemática 1990-2019. Revista de Investigación Agraria y Ambiental, 12(2), 161 – 178. DOI: https://doi.org/10.22490/21456453.4040

En la actualidad, la agricultura intensiva se encuentra asociada con múltiples problemáticas ambientales que incluyen enfermedades, sequía, deficiencia de nutrientes, erosión, pérdidas de la biodiversidad, y fragmentación del paisaje, entre otros. Además, el uso masivo de compuestos químicos conlleva un incremento de los costos de producción para los agricultores de todo el mundo y conduce a una importante contaminación ambiental; así como a la disminución a largo plazo de la productividad de los cultivos (Jewell et al., 2010).

En este contexto, las prácticas agrícolas se deben dirigir a una agricultura sostenible con el fin de mantener el rendimiento de los cultivos y preservar los agroecosistemas. Una de las alternativas para lograr la sostenibilidad en la producción agrícola es el uso de microorganismos del suelo, como las rizobacterias promotoras de crecimiento vegetal (PGPR, Plant Growth Promoting Rhizobacteria), que colonizan activamente las rizósfera, ejerciendo un efecto benéfico sobre el desarrollo de las plantas. Las PGPR pueden influir en el crecimiento de las plantas mediante mecanismos directos como la fijación de nitrógeno, la solubilización de minerales y la producción o cambio en la concentración de hormonas vegetales; y por mecanismos indirectos como producción de metabolitos antifúngicos, sideróforos, actividad lítica, inducción de resistencia sistémica, competencia y desplazamiento (Schroth y Becker, 1990; Kloepper, 1993).

Por lo anterior, en las últimas décadas se ha incrementado el interés por el estudio de este grupo de bacterias, no solo por su potencial para la estimulación del crecimiento de cultivos o como agentes de biocontrol, sino además por su uso prometedor en la descontaminación de suelos, reforestación y recuperación de ecosistemas. Es por esto que se ha hecho necesario realizar estudios experimentales que permitan evaluar el papel de las PGPRs en la agricultura. Mukhtar et al. (2017) demostraron el efecto de bacterias solubilizadoras en el crecimiento del trigo; Xiang et al. (2017) se centraron en la evaluación del potencial de las PGPR como agentes de biocontrol en soja. También se ha demostrado la influencia de las PGPRs para estimular el crecimiento de las plantas en diferentes condiciones de estrés, como lo presentan Mahmood et al. (2016) bajo condiciones de salinidad. De manera similar, Rizvi y Khan (2018) evaluaron el potencial PGPR bajo condiciones de estrés por metales. También se han llevado a cabo diversas revisiones narrativas, por ejemplo, Etesami y Maheshwari (2018) describen los mecanismos de acción a través de los cuales las PGPR podrían aliviar el estrés abiótico en las plantas, mientras que la revisión de Mhatre et al. (2018) se concentró en las estrategias de control biológico de nematodos basados en PGPR.

Estos antecedentes evidencian la disponibilidad de investigaciones sobre las PGPR; sin embargo, la información se encuentra dispersa y, a la fecha, no existe un análisis sistemático y exhaustivo que describa y sintetice de forma global las investigaciones sobre PGPR, así como los mecanismos de acción y su efecto sobre diferentes cultivos, lo cual representa una limitación en este campo del conocimiento y una barrera para el desarrollo de investigaciones experimentales posteriores. Por lo anterior, el objetivo de este estudio fue realizar un análisis sistemático de las publicaciones sobre PGPR en el ámbito mundial, permitiendo sintetizar la evidencia de los mecanismos de acción, variables de respuesta de las plantas, microorganismos y plantas utilizadas en la evaluación del potencial PGPR.

Tipo de estudio: revisión sistemática de la literatura científica, bajo el enfoque amplio de Cochrane, que corresponde a un resumen completo de la evidencia. Este enfoque es una aproximación práctica para resumir la literatura científica mundial disponible en un campo específico del conocimiento, actualizar la evidencia alrededor de una temática en particular, agrupar las investigaciones disponibles, analizar las tendencias, y generar hipótesis o identificar áreas relevantes para orientar estudios posteriores (Centro Cochrane Iberoamericano, 2012).

Protocolo de investigación de acuerdo con PRISMA (Urrutia y Bonfill, 2010)

Identificación de artículos y estrategia de búsqueda: Se realizó una búsqueda sistemática de literatura en las bases de datos ScienceDirect, PubMed y Scielo. En ScienceDirect se empleó la opción "Título/Resumen/Palabras claves" de la búsqueda avanzada, ingresando el término “PGPR” y “Plant growth promoting rhizobacteria”. En PubMed y Scielo se usó la opción “Título/Resumen” de la búsqueda, ingresando los mismos términos. Se exportaron las referencias encontradas, junto con su respectivo resumen, a un administrador de referencias Zotero, en el que se eliminaron las referencias duplicadas. De manera retrospectiva, no se aplicaron restricciones y, de manera prospectiva, la última actualización del protocolo se realizó en julio del 2019, de esta forma se estableció la ventana de tiempo de esta revisión entre 1990, que corresponde a la década en que se halló la publicación más antigua, y el 2018, con una actualización manual para identificar nuevas publicaciones en 2019.

Tamizado: se incluyeron investigaciones con los términos de búsqueda en título, resumen o palabras clave, investigaciones originales (con lo cual se excluyeron editoriales y revisiones de tema) y estudios en los cuales el desenlace central se enfocaba en rizobacterias promotoras de crecimiento vegetal.

Elección: En esta fase se excluyeron los artículos en los que no fue explícita la evaluación del mecanismo promotor de crecimiento vegetal por parte de microrganismos; que no realizaran ensayos in vitro; y que incluyeran pruebas de estimulación in vivo bajo condiciones no inducidas, es decir, se excluyeron aquellos estudios donde realizaron pruebas in vivo bajo condiciones ambientales controladas (cámara de crecimiento), esto con el fin de describir el efecto directo de las PGPRs sobre el crecimiento de las plantas, sin el control de factores ambientales sujetos a las pruebas experimentales. De igual manera, se excluyeron los artículos que no clasificaran de manera taxonómica los microorganismos evaluados mediante técnicas moleculares, y estudios que evaluaran microorganismos genéticamente modificados, de forma que se sistematizara las publicaciones sobre PGPR en condiciones naturales y experimentalmente reproducibles.

Inclusión: se incluyeron artículos originales de investigación reportados en la literatura científica comprendidos en los años 1990-2018 extrayendo las variables de título, autores, año, país, mecanismo de las PGPR, tipo de planta y sus parámetros de crecimiento, así como el microorganismo evaluado. Se extrajeron los datos de cada publicación y se tabularon en un archivo plano estandarizado en Excel.

Reproducibilidad de la revisión sistemática: la evaluación de la reproducibilidad del estudio se llevó a cabo mediante la implementación de todo el proceso de búsqueda y selección de artículos, así como la recopilación de información, por dos revisores independientes, y el desacuerdo se resolvió por consenso o verificación por un tercero.

Análisis de la información: con las variables del estudio, se realizó una síntesis cualitativa de la información mediante frecuencias absolutas (n) y relativas (%), así como por intervalos de confianza del 95% para las proporciones mediante el estadístico P ± {Zα/2*[√ (PQ/n)]}, donde P es la proporción, Zα/2 el nivel de confianza (del 95%), Q es el complemento de P y n el número de datos analizados (o la frecuencia absoluta). Para describir la distribución de los estudios según el país de origen, se realizó un mapa empleando la plataforma MapChart Create Custom Map, y tomando tres rangos, el primero incluyó los países con 1-10 artículos, el segundo era para países con 11-20 estudios y el tercero abarca los países con más de 20 manuscritos.

Descripción de los artículos incluidos

Se identificaron 2,525 artículos de investigación de los cuales se tamizaron con lectura de títulos y resumen 1,570, de estos solo 160 cumplieron con el protocolo de esta revisión (Figura 1).

Figura 1.
Flujograma de búsqueda y selección de los estudios incluidos en esta revisión acorde con las cuatro fases de la guía PRISMA.
Fuente: Autores

De los 160 estudios (ver Anexo), el 74.4% (n=119) corresponde a investigaciones realizadas en Asia; 18.1% (n=29) en América; 5.6% (n=9) en Europa; y 1.9% (n=3) en África, siendo India (n=58), China (n=18) y Corea del sur (n=15) los países con el mayor número de investigaciones (Figura 2).

Lo anterior evidenció que la mayoría de estudios proceden de Asia, principalmente de la India, esto podría relacionarse de manera indirecta con el hecho de que este país, sumado a Estados Unidos, son potencias agrícolas mundiales. Aunque el país asiático presenta mayor investigación en agroecología, al tiempo que se encuentra entre los principales productores de varios cultivos, contando con la mayor área cultivada de trigo, arroz y algodón; además, es el segundo mayor productor de arroz, trigo, algodón, caña de azúcar, frutas, verduras y té (World Bank, 2012; Deshpande, 2017). También se debe destacar que el arroz es el principal cultivo alimentario no solo en India sino también en el mundo, resaltando además que el 90% del arroz mundial se produce en Asia y según estadísticas de Agriculture Market Information System (AMIS) en el 2018, India produjo 115,63 millones de toneladas de arroz. Por lo anterior, es plausible afirmar que en este país se hace una búsqueda de nuevas técnicas agrícolas amigables con el ambiente que generen a su vez un incremento en el rendimiento de los cultivos. Esto se evidenció en el estudio de Wezel y Soldat (2009), donde demostraron que India se encuentra dentro de los países con más publicaciones sobre agroecología, incrementando el interés en el desarrollo de diferentes tecnología que involucra el aislamiento y evaluación de microorganismos benéficos para las plantas como las PGPR (Lavakush et al., 2014; Karthiba et al., 2010).

Investigación sobre PGPR en América

Si bien India es el país con mayor número de investigaciones sobre PGPR según nuestro protocolo de búsqueda y selección, cabe resaltar que existen otros países latinoamericanos que también han contribuido en el estudio de las PGPR, aunque en menor medida. Se encontró que, en Colombia, las investigaciones obtenidas se encontraban enfocadas en la bioprospección de PGPR, la evaluación de sus mecanismos de acción, así como su efecto sobre el crecimiento vegetal. En tal sentido, Posada et al. (2016) exploraron una estrategia de bioprospección de bacterias formadoras de endosporas aerobias (AEFB) que podrían ser útiles para desarrollar un producto biotecnológico para promover el crecimiento de las plantas de banano; Pérez-Pazos y Sánchez-López (2017) evaluaron el efecto de bacterias asociadas al cultivo de batata, con capacidad de promover el crecimiento vegetal en plántulas de batata.

A estos se suman estudios de investigadores de Brasil y México que han realizado aportes relevantes en este campo del conocimiento. A este respecto, Braga et al. (2018) caracterizaron aislados bacterianos obtenidos de las raíces del arroz y determinaron su capacidad para promover el crecimiento de las plantas, mientras que De Gregorio et al. (2017) evaluaron el efecto de inoculantes PGPR en semillas de soja sobre los parámetros de crecimiento. En México por su parte, Morgado González et al. (2015) evaluaron el efecto de cepas PGPR en la variedad comercial de caña; Martínez et al. (2013) identificaron bacterias aisladas de la rizosfera del tomate en función de sus propiedades promotoras del crecimiento vegetal, y evaluaron su efecto en el desarrollo de plántulas de tomate y pimiento.

Géneros microbianos en los PGPR de los estudios incluidos

Figura 2.
Países de origen de las publicaciones sobre las aplicaciones de las PGPR encontradas en la revisión sistemática.
Fuente: Autores

Como resultado de la revisión, se identificaron 63 géneros microbianos diferentes, los más estudiados fueron Bacillus en el 43.1% (IC95%=35.1-51.1) de los estudios, Pseudomonas en el 41,5% (IC95%=33.3-49.2) y Enterobacter en el 10.6% (IC95%=5.5-15.7), en la tabla 1 aparecen los demás géneros identificados en la revisión. Además, los siguientes géneros fueron analizados con una frecuencia de 0.6% (n=1 estudio): Agrobacterium, Arthrobacter, Azorhizobium, Bradyrhizobium, Citrobacter, Comamonas, Ensifer, Enterococcus, Exiguobacterium, Fictibacillus, Gluconacetobacter, Gordonia, Hartmannibacter, Lysinibacillus, Lysobacter, Mesorhizobium, Microbacterium, Micrococcus, Mycobacterium, Phosphorobacillus, Planococcus, Promicromonospora, Providencia, Rhodobacter, Rhodococcus, Rhodopseudomonas, Shewanella, Sphingobacterium, Sporosarcina, Streptomyces, Tetrathiobacter, Trabulsiella, Variovorax, Virgibacillus y Viridibacillus. A continuación, se explicitan algunas características importantes de los tres géneros más estudiados en PGPR.

En particular, Pseudomonas es un género con capacidad biocontroladora, responsable de la supresión natural de algunos patógenos transmitidos por el suelo, estimulador del crecimiento de las plantas y solubilizador de minerales; además, presenta una alta tasa de crecimiento en condiciones in vitro, lo cual facilita su producción en masa (Howell y Stipanovic, 1979; Kraus y Loper, 1992; Oteino et al., 2015). Cabe resaltar que Howell y Stipanovic (1980) y Ramamoorthy et al. (2010) pudieron evidenciar que las Pseudomonas fluorescens producen un amplio espectro de metabolitos bioactivos; es decir, antibióticos, sideróforos, volátiles y sustancias promotoras del crecimiento vegetal, permitiéndole una mejor adaptación al estrés ambiental. Lo anterior podría explicar el gran interés como objeto de estudio en diversas investigaciones.

Así mismo, el género Bacillus ha sido ampliamente estudiado por su capacidad para formar endosporas, lo que le confiere resistencia ante condiciones ambientales adversas. Además, posee un gran potencial para estimular el crecimiento vegetal por medio de la síntesis de fitohormonas (ácido indol-3-acético, giberalinas, entre otras), la solubilización de fosfato, y la producción de diferentes metabolitos con actividad antagónica, tales como los lipopéptidos tipo fenginicina y surfactina, que estimulan la resistencia sistémica inducida, e inician la respuesta inmune en las plantas (Glickmann y Dessaux, 1995; Pliego et al., 2011; Xie et al., 2017). Dadas las particularidades metabólicas del género Bacillus y su habilidad para formar endosporas, estas bacterias se presentan como una alternativa altamente promisoria para la formulación de productos biotecnológicos de uso agrícola (Bowen y Rovira, 1999).

Otro género destacable durante la revisión fue Enterobacter, el cual tiene la capacidad de conferir resistencia al estrés salino, ya que posee genes que regulan la homeostasis iónica, facilitando la adaptación de las plantas en condiciones de alta salinidad (Padan, 2008; Sandhya et al., 2010). Las Enterobacter spp. tienen la habilidad de producir fitohormonas (citoquininas, AIA, entre otras), inhibir el crecimiento de fitopatógenos y de solubilizar fosfato, lo cual se ha documentado en diferentes estudios (Mehnaz et al., 2001; Hynes et al., 2008; Oteino et al., 2015). A pesar de las características PGPR dadas por las Enterobacter, se encontró que, en comparación con Bacillus spp. y Pseudomonas spp., fue el género menos reportado en las publicaciones, lo cual se puede deber a que es un género relacionado con infecciones oportunistas de gran importancia clínica, lo cual limita su uso como PGPR (Chart, 2012; Dijun et al., 2016).

Tabla 1.
Distribución porcentual de los géneros microbianos de PGPR estudiados en las publicaciones encontradas en la revisión sistemática.

Fuente: Autores

Mecanismos de PGPR en los estudios incluidos

En total, se identificaron 22 mecanismos PGPR diferentes, siendo AIA (ácido indolacético), solubilización de fosfato, antagonismo y producción de sideróforos los de mayor frecuencia (Tabla 2). Esta evidencia se puede deber a que son mecanismos PGPR que hacen relación tanto a la estimulación del crecimiento como a la actividad biocontroladora, haciendo alusión a la producción de fitohormonas, solubilización de nutrientes e inhibición de fitopatógenos, lo que deriva en efectos benéficos para el desarrollo de las plantas (Glick y Bashan, 1997; Van Loon et al., 1998; Whipps, 2001; Zahir et al., 2003). El AIA, es una de las auxinas más estudiadas dado que produce un incremento en el crecimiento vegetal, además está involucrada en la diferenciación y en la elongación del tallo (Arshad y Frankenberger, 2016). Por otra parte, la solubilización de minerales como el hierro y fosfatos son comúnmente asociados con las PGPR, debido a que facilitan la disponibilidad de estos nutrientes en el suelo y aumentan la productividad de las plantas.

Con respecto a la captación de hierro, esta actividad se encuentra relacionada con el uso de sideróforos bacterianos por las plantas, mientras que la disponibilidad de fosfato está relacionada con la producción de enzimas del grupo de las fosfatasas, lo cual permite un incremento significativo en la toma de este macronutriente, importante para los procesos metabólicos de las plantas (Van Loon et al., 1998; Bakker et al., 2003; Guang-Can et al., 2008; Liu et al., 2015). Aunque se ha demostrado que diferentes géneros bacterianos presentan este rasgo, la mayor parte de los reportes corresponden a Pseudomonas y Bacillus (Bowen y Rovira, 1999; Zahir et al., 2003).

La capacidad antagónica resulta ser un mecanismo crucial para la defensa de las plantas, ya que permite la inhibición de microorganismos causantes de diversas enfermedades (Glick y Bashan, 1997; Whipps, 2001); además, la evaluación experimental de los mecanismos mencionados con anterioridad, no involucran una alta complejidad a nivel de laboratorio, ni representa un alto costo económico, ya que se emplean metodologías de fácil ejecución (Uzoh et al., 2018).

Especies vegetales en las que se ha estudiado de efecto de las PGPR

Dichos mecanismos se evaluaron en 58 especies vegetales diferentes, con mayor frecuencia en maíz, tomate, trigo y arroz (Tabla 3). Además, las siguientes especies se estudiaron en una frecuencia de 0.6% (n=1) estudios: cañuela, agropiro, alfalfa, lavanda, amapola, arveja, batata, banano, bufera, mungo, calabaza, castor (ricino), cebada, ciruelo, coco, eucalipto, encina, jengibre, kikuyu, kiwi, almorta (Lathyrus), lolium, mango, manzano, margaritas, nabo, sorgo, papa, palma de aceite, tulsí, trebol rojo y timothy. Es posible que se realice con mayor frecuencia esta evaluación en los estudios de las especies maíz, tomate, trigo y arroz, debido a su rápido crecimiento, que permite evaluar el efecto de las PGPRs en las diferentes etapas del crecimiento vegetal. Además, cabe resaltar que son cultivos de gran importancia a nivel mundial, debido a la alta demanda alimentaria (Deshpande, 2017; Agricultural Market Information System (AMIS) 2018).

Tabla 2.
Distribución de frecuencias de los mecanismos PGPR identificados en los estudios descritos en la revisión sistemática.

Fuente: Autores

Tabla 3.
Frecuencia de las especies vegetales en las que se ha estudiado de efecto de las PGPR.

Fuente: Autores

Variables de crecimiento de las plantas usadas en los estudios que demuestran el efecto de las PGPR

Finalmente, en la tabla 4 se presentan las medidas para el evaluar el efecto de las PGPR sobre diferentes componentes de las plantas utilizadas en los estudios, a dichas medidas de eficacia se suman las siguientes, estudiadas con una frecuencia de un (1) estudio: diámetro del brote, diámetro del estoma, diámetro de la raíz, índice de cosecha, longitud del fruto, número de flores, peso de tuzas de mazorcas, peso fresco de 100 vainas, peso fresco total de raíz y brote, peso seco total de raíz y brote, porcentaje de aumento de la raíz, porcentaje de aumento del brote, porcentaje de aumento sobre el control, rendimiento foliar, rendimiento por hectárea y tiempo de emergencia.

Además, como se mencionó en el protocolo de búsqueda, se incluyeron artículos en donde se especifica que las condiciones ambientales de las pruebas in vivo no fueron controladas; encontrando que de un total 160 estudios, 71.25% fueron realizados en invernadero, 17.5% en campo, 10.62% incluyeron pruebas en campo e invernadero y un 0,62% no especifican el sitio de experimento.

Tabla 4.
Variables de crecimiento de las plantas usadas en los estudios que demuestran el efecto de las PGPR.

Fuente: Autores

En el último año se ha aumentado el número de publicaciones en este tema, destacándose el estudio de Amaresan et al. (2019) donde evaluaron la capacidad de bacterias asociadas a las plantas de tomate para reducir la incidencia de diferentes enfermedades y determinaron sus efectos sobre el rendimiento en condiciones naturales de campo. En su estudio, Dede et al. (2020) evaluaron la actividad antagónica de actinomicetos aislados de la rizosfera del olivo y su efecto promotor de crecimiento con la finalidad de ser utilizados como biofertilizantes en futuros estudios. La investigación de Andy et al. (2020) giró en torno al aislamiento y caracterización de diferentes PGPR de la zona de la raíz de diferentes leguminosas que en el futuro podría resultar como un biofertilizante revolucionario y bioinoculantes.

Recomendaciones para estudios posteriores

Vale la pena señalar que aún se deben realizar investigaciones más exhaustivas que ayuden a la comprensión de los mecanismos de fitoestimulación mediada por las PGPR, que tengan como objetivo detectar cepas de rizobacterias más competentes que puedan funcionar en diversas condiciones agroecológicas; esto podría garantizar la estabilidad de las PGPR en la productividad agrícola. Específicamente en los hallazgos obtenidos en esta revisión sistematizada se podrían evaluar en futuros estudios que realicen pruebas de estimulación en campo, determinando la efectividad de las PGPR no solo a nivel de laboratorio sino a gran escala. Además de la evaluación de consorcios de microorganismos efectivos que posteriormente puedan ser utilizados en el desarrollo de formulaciones microbianas, permitiendo de esta manera diseñar y obtener productos agrícolas eficientes, conduciendo como fin último a una agricultura sostenible.

En el ámbito mundial, India es el país con más publicaciones sobre PGPR, debido a que es considerado como una potencia agrícola mundial; además de su gran interés por desarrollar biotecnologías en el marco de una agricultura sostenible. Se sintetizó la principal evidencia de los mecanismos PGPR en el ámbito mundial, siendo AIA, solubilización de fosfato, antagonismo y producción de sideróforos los de mayor frecuencia, y abarcan mecanismos directos e indirectos de la forma en que las rizobacterias pueden promover el crecimiento de las plantas. Los microorganismos más estudiados fueron Bacillus, Pseudomonas y Enterobacter, ya que estos poseen rasgos PGPR efectivos como capacidad biocontroladora, solubilización de minerales, síntesis de fitohormonas y capacidad de conferir resistencia al estrés salino, como es el caso del género Enterobacter. Finalmente, las especies vegetales más frecuentemente estudiadas fueron maíz, tomate, trigo y arroz, cultivos de gran importancia alimentaria. En conjunto, estos hallazgos son relevantes para identificar las principales líneas de acción en futuras investigaciones cuyo propósito sea a mejorar la salud, producción de cultivos y sostenibilidad ambiental.

CÓMO CITAR: Posada, A., Mejía, D., Polanco-Echeverry, D., y Cardona, J. (2021). Rizobacterias promotoras de crecimiento vegetal (PGPR): Una revisión sistemática 1990-2019. Revista de Investigación Agraria y Ambiental, 12(2), 161 – 178. DOI: https://doi.org/10.22490/21456453.4040

CONTRIBUCIÓN DE LA AUTORÍA: Primer autor: metodología, investigación, análisis de datos, conceptualización, escritura – borrador original. Segundo autor: metodología, investigación, análisis de datos, conceptualización, escritura – borrador original. Tercer autor: revisión y edición. Cuarto autor: conceptualización, investigación, logística, escritura – revisión y edición.

CONFLICTO DE INTERESES: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.

https://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/riaa/article/view/4040 (html)

https://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/riaa/article/view/4040/4499 (pdf)

A los grupos de investigación, Salud y Sostenibilidad y Microbiología Veterinaria de la Escuela de Microbiología, Universidad de Antioquia.