INTRODUCCIÓN

El trigo en Paraguay es afectado principalmente por un complejo de enfermedades fúngicas en presencia de ambientes favorables para los patógenos, entre ellas, la fusariosis de la espiga de trigo (FET) causada por el complejo Fusarium graminearum (Sacc), teleomorfo Gibberella zeae (Schwabe), que se constituye en una de las enfermedades más destructivas, no solo por el impacto en la producción de granos sino por el deterioro en la calidad del grano, especialmente por el alto nivel de micotoxinas producidas por el hongo (Quintana Viedma, 2012; Arrúa Alvarenga et al., 2014).

Entre las diversas especies que causan la fusariosis del trigo en el país se pueden citar a F. graminearum, F. semitectum, F. avenaceum, F. equisiti y F. culmorum, (Quintana & Morel, 2004; Arrúa, 2015). F. graminearum es considerado el patógeno causante de la fusariosis de la espiga más prevalente y agresivo en el trigo en varios países de la región como Uruguay, Argentina, Brasil y Paraguay (Umpierrez-Falaiche et al., 2013; Martínez et al., 2014; Deuner, Viana, Nicolodi Camera, Camera & Melo Reiss, 2015; Arrúa, 2015).

Fusarium graminearum y Fusarium culmorum se encuentran entre las especies más importantes causantes de la fusariosis de la espiga y son considerados asimismo las de mayor capacidad de acumulación de deoxinivalenol (DON), una micotoxina del grupo de los tricotecenos, causante de micotoxicosis grave en humanos y animales (Scarpino, Reyneri, Sulyok, Krska & Blandino, 2015; Nielsen, Cook, Edwards & Ray, 2014). En el Paraguay, Fusarium graminearum es aislado en 90% de las muestras de semilla de trigo proveniente de cultivos comerciales (Quintana & Morel, 2004; Arrúa, 2015). La infección por FET y la presencia de DON en granos de trigo dependen de varios factores, sobre todo las condiciones climáticas prevalecientes en el estado de floración, pero también influyen otros factores como la rotación de cultivos, siembra sobre rastrojos, susceptibilidad varietal y aplicación de fungicidas (Reis, Baruffi, Remor & Zanatta, et al., 2011). El hongo sobrevive en restos de cultivo y tiene una amplia gama de hospederos y su inóculo está presente en el aire durante todo el año. Las epidemias de FET son compatibles con los sistemas de cultivo que dejan una gran cantidad de restos de cultivos en la superficie del suelo (Xu et al., 2008; Blandino et al., 2012). Existen asimismo estudios que relacionan al rastrojo de trigo con elevados niveles de contaminación de DON (Bissonnette, Kolb, Ames & Bradley, 2018), por lo que algunas estrategias de manejo como la rotación de cultivos no son muy eficientes (Reis, Baruffi, Remor & Zanatta, 2011).

Por otro lado, la resistencia genética, se destaca como la estrategia más eficiente y de menor costo y a pesar de eso, se verifica, que para el patosistema fusariosis-trigo, estudios más recientes muestran genotipos con cierto grado de resistencia o tolerancia a F. graminearum (Arrúa et al., 2014; Alberione, Ortega, Salines, Astoreca & Alconada, 2016; Gagkaeva, Orina, Gavrilova, Ablova, & Bespalova, 2018). A pesar de estos hallazgos, el nivel de tolerancia a los trigos comerciales a nivel de campo aún no es satisfactoria. La aplicación de fungicidas juega un papel importante en el manejo integrado de la FET, los fungicidas se aplican generalmente en la antesis para disminuir las pérdidas de rendimiento y la contaminación por micotoxinas (Amarashinghe, Tamburic-Ilincic, Gilbert, Brulé-Babel & Dilanha, 2013). En general, se reporta que los fungicidas DMI (inhibidores de la biosíntesis de esteroles) como triazoles e imidazoles son los más utilizados contra infección de FET y contaminación de granos, en contraste con las estrobilurinas que aumentan la concentración de DON (Haidukowski et al., 2005; Paul et al., 2008; Wegulo, 2012; Garmendia et al., 2018). Se han reportado disminuciones de DON en granos de 46-48 % con aplicaciones de tebuconazol y metconazol (Ioos, Belhadj, Menez & Faure, 2005).

A nivel nacional, la principal estrategia utilizada en el país para proteger el trigo contra la FET es a través de aplicaciones de fungicidas, durante la antesis. Hasta la fecha, no se han realizado en el país trabajos de investigación sobre control químico de la fusariosis de la espiga del trigo y su relación con el contenido de micotoxinas en granos, por lo que el objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la aplicación de distintos grupos químicos de fungicidas para control de FET y su efecto en el rendimiento y el contenido de DON en grano de trigo.

MATERIALES Y MÉTODOS

Ubicación del ensayo y tratamientos fungicidas.

El experimento se llevó a cabo durante el ciclo 2016 en la parcela experimental del Instituto Paraguayo de Investigaciones Agrarias (IPTA) en la localidad de Capitán Miranda, Departamento de ITAPÚA, Paraguay. La variedad de trigo utilizada fue Canindé 13, moderadamente susceptible a FET. Los tratamientos incluyeron siete fungicidas solos o en mezcla y un control sin aspersión, totalizando 7 tratos.

Fungicidas evaluados y dosis:

1.Tebuconazol 25% (750 ml ha^{- 1} )

2.Metconazol 2,75% + epoxiconazol 3,75 (1500 ml ha^{- 1} )

3.Metconazol 2,75% + epoxiconazol 3,75% (2000 ml ha^{- 1} )

4.Azoxistrobina 20% + ciproconazol 8% (3,5 ml ha^{- 1} )

5.Fluxapiroxad 5% + epoxiconazol 5% + piraclostrobina 8,1% (10,5 ml ha^{- 1} )

6.Azoxistrobina 30% + benzovindiflupir 15% (300 ml ha^{- 1} )

El diseño utilizado fue de bloques al azar por tres repeticiones con arreglo factorial. Las parcelas experimentales consistieron en 12 surcos de 5 m de largo con una distancia de 0.18 m entre surcos. Los fungicidas se aplicaron en tres estados de crecimiento ( Zadoks , Chang & Konzak , 1974), earing (GS 61); 50% antesis (GS.65) y grano lechoso (GS 8.3). Las aplicaciones de los fungicidas se realizaron con un aspersor de mochila propulsado con CO ₂ provisto de seis picos de abanico Teejet espaciados 50 cm entre boquillas y con una barra de 2 m de largo con un volumen de 1000 ml de agua.

Las temperaturas medias, la humedad relativa y las precipitaciones durante junio, julio, agosto y septiembre se presentan en la Tabla 1.

Cuadro 1. Temperaturas medias, humedad relativa y precipitación durante junio, julio, agosto y septiembre de 2016.

Estación Meteorológica. Capitán Miranda de IPTA (2016)

Meses	Precipitación mm	Temperatura ºC	Humedad relativa %
junio	9.00	11,6	71,8
julio	29,50	17,5	77,2
agosto	40,50	18.0	74,0
septiembre	39,00	12,5	78,2

Durante el ciclo del cultivo se registraron escasas precipitaciones, distribuidas en los 4 meses registrándose en el mes de agosto la mayor cantidad de lluvia totalizando 41 mm coincidiendo con la etapa de espigazón y floración del cultivo.

Evaluación visual de picos con síntomas.

La incidencia de la enfermedad y la gravedad de cada parcela se evaluaron visualmente 20 días después de la aplicación del fungicida de acuerdo con la escala de Stack y Mac Mullen (1995). Para la incidencia, se utilizó la fórmula: número de picos con síntomas / picos totales x 100. La incidencia de la enfermedad se expresó como el porcentaje de picos infectados en las 3 filas centrales de cada parcela. La severidad. como el porcentaje medio de cada oído infectado, en una escala del 0 al 100%. El índice FET para cada parcela se calculó mediante la siguiente fórmula: índice FE = (porcentaje de incidencia de la enfermedad × porcentaje de gravedad de la enfermedad / 100.

Determinación de rendimiento y peso de mil semillas.

Los granos se cosecharon en la madurez mecánicamente utilizando una trilladora experimental Wintersteiger y se pesaron con una balanza de precisión y se expresaron en kg ha^{- 1} . Para la determinación del peso de mil granos y la humedad se tomaron submuestras con granos de cada parcela. El peso de mil granos se expresó en gramos. La humedad se ajustó al 12%.

Determinación de niveles de DON en muestras de semillas

Para la cuantificación de la micotoxina DON se tomó como muestra 1 kg de semilla en cada tratamiento y se envió al Laboratorio de Calidad de Semilla de la Cooperativa Colonias Unidas. Se utilizaron el kit de lector de flujo lateral VICAM © Vertu y cintas de cuantificación Don-V. Límite de detección de 0,1 a 5 ppm.

Análisis estadístico

Se realizó el Análisis de Varianza (ANOVA) para el índice de fusariosis del huso (Índice FET) peso de mil granos, rendimiento y contenido de DON utilizando el paquete estadístico InfoStat (Di Rienzo , Casanoves , Balzarini , González , Tablada & Robledo, ( 2013) y para los valores que resultaron significativos, la comparación de medias se realizó mediante la prueba de Duncan (p <= 0.05). fungicidas en las variables FET, los tratamientos con fungicidas, incluido el control sin protección química, se incluyeron en los primeros análisis, luego se realizó un análisis separado sin el control de fungicida no en polvo para identificar diferencias entre los tratamientos con fungicidas.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Evaluación visual del índice FET

Las condiciones ambientales predominantes en 2016 fueron favorables para el desarrollo de F. graminearum en condiciones de campo (Cuadro 1). Sin embargo, el índice FET mostró una diferencia altamente significativa (P <0.001) para los tres efectos estudiados (FET, peso de 1000 granos y nivel de toxina DON (Cuadro 2). Los fungicidas evaluados disminuyeron el índice FET promedio (8, 4) en diferentes tiempos de aplicación, en comparación con el control sin protección química (Figura 1) También hubo un aumento en componentes de producción como rendimiento promedio de grano (13%) y peso de mil granos (11%) en relación al control sin químico control (Figuras 2 y 3). Estos resultados son similares a los encontrados por otros autores que confirman la eficacia de los fungicidas de triazol para el control de FET ya sea en condiciones de infección de campo natural o en condiciones controladas ( Baturo-Cieśniewska , Lukanowski & Kolenda , 2011; Blandino et al., 2012; Amarashinghe et al.2013). Blandino, Pilati y Reyneri (2009) informan que en las aplicaciones de fungicidas de triazol de espiga completa , se logró una reducción del 14% y el 11% en la incidencia y severidad de FET en comparación con el control no rociado.

Producción de grano

ANOVA n las diferencias significativas entre fungicidas evaluados, pero fue positivo para el efecto tiempo de aplicación de fungicidas x rendimiento (Cuadro 2). Todos los tratamientos con fungicidas aumentaron los rendimientos en comparación con el control sin control químico (Figura 2), lo cual es similar al trabajo de otros investigadores que reportaron reducciones en FET y aumento de rendimiento de grano entre 17 y 80% con la aplicación de diferentes fungicidas. Triazoles ( protioconazol , tebuconazol , metconazol y protioconazol + tebuconazol ) evaluado en relación con el sin empolvar control ( Amarashinghe et al., 2013). De hecho, Blandino et al. (2009) informan que los fungicidas del grupo de los triazol, rociados en media antesis, llevaron a un aumento del 20% en el rendimiento del trigo duro.

Peso de mil granos

El ANOVA mostró una diferencia altamente significativa para la variable peso de 1000 granos, la cual fue afectada significativamente por los fungicidas evaluados. Todos los tratamientos evaluados incrementaron el peso de mil granos en la variedad Canindé13, respecto al testigo sin control químico (Figura 3). Estos hallazgos son similares a los reportados por Blandino et al. (2009), donde hubo incrementos del 7% en el peso de mil granos en comparación con los controles sin polvo. La interacción de productos fungicidas x momentos de aplicación no fue significativa para esta variable (Cuadro 2).

Acumulación de DON en granos

El nivel de toxina desoxinivalenol (DON) mostró una diferencia significativa en el ANOVA, la menor concentración de DON (1-2.5 ppm) se registró con el fungicida Tebuconazol, correspondiente al grupo químico de triazoles, otros fungicidas como el doble mezcla de Metconazol + El epoxiconazol a diferentes dosis también redujo significativamente el contenido de DON en los granos (Figura 4). Estos resultados son similares a los reportados por Scarpino et al. (2015). La mezcla de Fluxapyroxad + Epoxyconazole + Pyraclostrobin y, Azoxystrobin + Ciproconazole, mostró el contenido máximo de DON (4.0 ppm) en granos (Figura 4). Haidukowski y col. (2005) observaron que las muestras protegidas con azoxistrobina contenían más DON que las muestras protegidas con metconazol , lo que concuerda con los resultados de este trabajo. Por otro lado, la investigación realizada por Ioos et al. (2005) indican que en cultivos de trigo tratados con los fungicidas tebuconazol y metconazol , las concentraciones de toxina DON se redujeron en un 46 y 48%, respectivamente.

Cuadro 2. Valor p de significancia para rendimiento, peso de mil semillas, deoxinivalenol y fusariosis de espiga de trigo.

PMS: peso de mil semillas, DON: Deoxinivalenol , FET: fusariosis de espiga de trigo, **: altamente significativo ^{, ns} : no significativo

		Significación estadística (valor de p)
Fuente de varianza	Rendimiento	Síndrome premenstrual	DON	FET
Productos fungicidas	0,2969 ( ns )	<0,0001 (**)	<0,0001 (**)	<0,0001 (**)
Tiempo de aplicación	0,0001 (**)	0.2002 ( ns )	-	<0,0001 (**)
Interacción fungicida x momento	0.2002 ( ns )	0,0669 ( ns )	-	<0,0001 (**)

Cuadro 3 . Valor p de significancia para momentos de aplicación en tres estados fenológicos del cultivo

**: diferencia muy significativa, ns : diferencia no significativa. Letras diferentes en las filas indican diferencias significativas (p <= 0.05) en la prueba de Duncan.

		Momentos
Nombre comercial	Pico	Floración	Grano lechoso	Promedios
Tebuconazol 750 cc	1484	1480	1394	1452
Duett plus 1,5 l	1525	1617	1324	1489
Duett plus 2l	1470	1584	1285	1446
Priori oro 3,5 cc	1458	1418	1391	1422
Orquesta 10,5 cc	1498	1397	1418	1438
Laberinto 300 gr	1602	1660	1349	1537
Promedios	1506 b	1526 b	1360 a	1464
Valor de los productos				0,29690 ns
Valor p momentos				0,00010 **
Interacción del valor p				0.20020 ns

Figura 1. Spike fusariosis index (FET) con diferentes tratamientos fungicidas

Figura 2. Rendimiento medio (Kg / ha) de la variedad Caninde 13 con diferentes tratamientos fungicidas.

Figura 3 . Peso promedio de mil granos (g) con diferentes tratamientos fungicidas

Figura 4 . Niveles de toxina DON expresados ​​en ppm con diferentes tratamientos fungicidas

CONCLUSIONES

Los resultados de este experimento realizado en campo, indicaron un nivel reducido de FET y aumentos en el rendimiento y menores niveles de contaminación del grano con micotoxinas DON, utilizando fungicidas triazol desde la etapa de descabezado hasta la mitad antesis. El tebuconazol logra reducir al menor contenido de la micotoxina DON en comparación con otros fungicidas evaluados. La mayoría de los fungicidas con estrobilurinas en su composición aumentaron el nivel de DON en los granos.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Notas de autor

ruti_scholz@hotmail.com

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Conflicto de intereses: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.

Contribución del autor: Todos los autores hicieron contribuciones sustanciales a la concepción y diseño de este estudio, al análisis e interpretación de los datos, a la revisión del manuscrito y la aprobación de la versión final. Todos los autores asumen la responsabilidad del contenido del manuscrito.